瞬时转染

相关知识：

采用瞬时转染的方法能够方便快捷地对基因功能进行研究与分析，且基因表达水平高，但通常只持续几天，多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。

实验流程：

1）质粒：

a. 进行预实验，通过转染含有报告基因的质粒优化转染条件；

b. 转染条件确定后，按照客户方案进行转染；

c. qPCR或Western Blot检测转染效率。

2）SiRNA：

a. 根据基因序列，设计并合成siRNA；

b. 进行预实验，通过转染带有荧光标记的阴性对照siRNA优化转染条件；

c. 通过qPCR和Western Blot验证siRNA的沉默效率，筛选siRNA最佳使用浓度。